Rapp. Comm. int. Mer Médit., 37,2004
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CARACTÉRISTIQUES ET SENSIBILITÉ À DIFFÉRENTS ANTIBIOTIQUES DES VIBRIOPATHOGÈNES
POUR LES POISSONS D’ÉLEVAGE LOUP ET DAURADE
Nakbi Amel* et Bakhrouf Amina
Laboratoire d’Analyse et de Contrôle des Polluants Chimiques et Microbiologiques de l’Environnement.
Faculté de Pharmacie. Rue avicenne. 5000 Monastir, Tunisie - * Nakbi_amel@yahoo.fr
Résumé
La recherche et l’identification des bactéries pathogènes du loup (Dicentrarchus labrax) et de daurade (Sparus aurata) ont été poursuivies
au cours des deux années (2001/2002) dans deux stations de pisciculture de littoral méditerranéen, en Tunisie. Les vibrions les plus fré-
quemment isolés au cours des épizooties étaient Vibrio alginolyticus. Ils ont été isolés en culture pure des différents organes internes (foie,
cœur, rate, rein et muscle ulcéreux) des poissons malades. Nous avons étudié les caractères biochimiques et antibiotypiques de ces souches
et nous avons trouvé qu’ils présentaient des caractères communs en faveur de leur virulence.
Mots clés: pisciculture, Vibrio, épizootie.
Introduction
Les problèmes d’épizooties observés chez les stades juvénile et
adulte du loup et de daurade d’élevage, nous ont incité à rechercher et
caractériser les germes susceptibles d’être pathogènes. Vibrio algino-
lyticus, Vibrio vulnificus, Vibrio anguillarumsont fréquemment isolés
dans des cas d’épizooties chez le loup (Dicentrarchus labrax) et la
daurade (Sparus aurata) en aquaculture méditerranéenne (1,2,3).
Nous avons pu décrire chez des daurades en phase de pré-grossisse-
ment (40 à 50 g) des lésions bien délimitées sous forme de nécroses
congestives au niveau des ?ancs et des nageoires, surtout à la base des
nageoires caudales. Les conditions décrites dans les deux stations
d’aquaculture étudiées présentent une salinité de 40‰, une tempéra-
ture de l’ordre de 15-18°C, un taux d’oxygénation de 4 à 5 ppm et une
densité de 50 à 70 kg/m
3
. Ces conditions sont adéquates pour l’éleva-
ge, mais aussi favorables pour le développement des vibrions plutôt
que d’autres germes.
Matériel et méthodes
Les prélèvements des organes et tissus infectés (muscle, foie, cœur,
rate, et rein) est effectué stérilement. L’enrichissement a été réalisé dans
du bouillon nutritif préparé à l’eau de mer. Les souches ont été ense-
mencées sur 2 milieux gélosés: une gélose nutritive préparée à l’eau
de mer (GNEM) susceptible de permettre la croissance d’un grand
nombre de bactéries hétérotrophes marines et TCBS agar, en principe
sélectif pour les vibrions halophiles. L’incubation a été faite à tempéra-
ture ambiante (22°C). La caractérisation des souches obtenues a été
faite selon une micro-méthode standardisée, galeries Api 20NE (Bio-
mérieux). En addition aux caractères étudiés sur ces galeries, quelques
tests complémentaires nécessaires à l’identification des bactéries de
l’environnement ont été réalisés (type respiratoire, type d’hémolyse sur
gélose au sang du mouton et l’utilisation de mucus épithélial de la peau
de daurade comme source de carbone (3).La sensibilité des souches aux
antibiotiques a été effectuée selon la méthode de Chabbert (4).
Résultats
Nous avons constaté que la vibriose est présente durant toutes les sai-
sons, il s’agit d’une pathologie à caractère insidieux. Les examens bac-
tériologiques ont permis d’isoler des souches de Vibrio. Nous avons
sélectionné les biotypes qui ont été responsables des mortalités impor-
tantes. Deux biotypes de Vibrio alginolyticusont été isolés dans deux
épizooties différentes de daurade en phase de prégrossissement quatre
autres biotypes de Vibrio alginolyticusont été isolés de l’hémoculture
des géniteurs du loup et une souche de Vibrio vulnificusa été isolées
chez des daurades malades de pré-grossissement. Toutes ces souches
ont été isolés en culture pure à partir de différents organes internes:
rein, rate, cœur, et foie, muscles infectés et du sang. Les caractères bio-
chimiques et antibiotypiques ont été résumés dans le tableau1.
Discussion et conclusion
Les épizooties semblent être fréquentes dans les deux centres
d’aquaculture.Les Vibrioisolésdisposent d’un arsenal enzymatique
riche tels que les hémolysines et les protéases capables d’hydrolyser
les substrats provenant de l’hôte notamment le mucus épithélial des
poissons. Plusieurs facteurs favorisent l’expression de la virulence des
Vibrio. Les manipulations de pêche et de tri dans les bassins de pré-
grossissement sont stressantes pour le poisson ce qui affaiblit son sys-
tème immunitaire. La densité élevée dans les bassins ainsi que les
conditions de température, salinité et oxygène dissous favorisent la
multiplication et la transmission de ces germes (1, 3).
L’étude de la résistance aux antibiotiques montre que les germes
sont très résistants. Cela pourrait être dû à la présence des mêmes
déterminants plasmidiques échangés entre les vibrions dans les eaux
de la station d’aquaculture. La multirésistance des vibrions, due à
l’utilisation abusive et non contrôlée des antibiotiques au cours des
maladies, les rend plus menaçants car l’échange des plasmides entre
les bacilles à Gram négatif est facilité en milieu marin (5).
Réferences
1-Bakhrouf A., Ben Ouda H. et Oueslati R., 1995. Essai de traitement des
vibrioses du loup Dicentrarchus labraxdans une zone de pisciculture, à
Monastir, Tunisie. Marine life,5(2) : 47-54.
2-Balebona M.C, Andreu M.J., Bordas A.M., Zorilla I., Morinigo A.M. et
Borrego J.J., 1998. Pathogenicity of Vibrio alginolyticusfor cultured gilt
–head sea bream (Sparus aurata). Appl. Env. Microbiol., 64(11): 4269-4275.
3-Bordas M.A., Balebona M.C., Zorilla I., Borrego J.J. et Morinigo
A.M., 1996. Kinetics of adhesion of selected fish-pathogenic Vibrio strains
to skin mucus of gilt –head sea bream (Sparus aurataL.). Appl. Env.
Microbiol., 62(10) : 3650-3654.
4-Chabbert Y.A., 1963. L’antibiogramme, sensibilité bactérienne aux
antibiotiques. Collection «techniques de base» Editions de la Tourelle,
Saint-Mandré, 230 p.
5-Gauthier M.J., Flatau G.N. et Bernard P., 1981. Tolérance au plomb, au
cadmium et au vanadium et résistance aux antibiotiques chez les bactéries
hétérotrophes de sédiments marins portuaires ou littoraux. Revue. Int.
Océanogr. Méd.,pp. 65-83.
Tableau 1. Caractères biochimiques et antibiotypiques des Vibrio isolés
au cours des épizooties
Souches I: souches isolées des épizooties des daurades. 1,2: Vibrio algi-
nolyticus. 3: Vibrio vulnificus. Souches II: souches isolées des épizooties du
loup. 1: Vibrio parahaemolyticus. 2,3,4: Vibrio alginolyticus. R: résistant, S:
sensible, I: intermédiaire.
