RECYCLING OF PARTICULATE NITROGEN WASTE FROM THE FISH FARMS: 
EFFICIENCY OF HARD SUBSTRATE DEPLOYMENTS
S. Lojen
1*
, D. Angel
2
, T. Katz
2
, E. Spanier
3
, M. Tsapakis
4
, I. Karakassis
4
N. Kovac
5
, A. Malej
5
, E.Cook
6
, K. Black
6
1
J. Stefan Institute, Ljubljana, Slovenia - * sonja.lojen@ijs.si 
2
National Centre for Mariculture, Eilat, Israel
3
The Leon Recanati Centre for Maritime Studies, University of Haifa, Israel
4
Institute of Marine Biology of Crete, Heraklion, Greece
5
Marine Biology Station, National Institute of Biology, Piran, Slovenia 
6
Scottish Association for Marine Science, Dunstaffnage Marine Laboratory, Oban, Argyll, U.K.
Abstract
The methodology for evaluation of hard substrate deployments for removal of particulate nitrogen waste deriving from aquaculture based
upon 
15
N/
14
N ratios of colonising organisms was developed and tested at four fish farms in N Atlantic, N Adriatic, E Mediterranean and
in the Red Sea. The hard substrates were proven efficient in oligotrophic environments, while in turbulent mesotrophic environments with
multiple nitrogen sources the effect of farm-derived particulate nitrogen on the fouling organisms could not be traced by environmental
isotopes.
Key words: fish farm, nitrogen, stable isotopes, suspension feeders
Rapp. Comm. int. Mer Médit., 37,2004
390
Introduction
Fish farms release large amounts of soluble inorganic and
particulate organic matter (POM) into the environment. In order to
capture effluents released from the fish farms, removable hard
substrates were deployed in the immediate surroundings of the fish
cages, so that these would be colonised by filtering organisms. 
The aim of the present study wasto examine whether the hard
substrate deployment can efficiently reduce the environmental impact
of particulate waste deriving from aquaculture. The ?ow of particulate
organic nitrogen from fish farms to the local food web was traced
using stable nitrogen isotopes. Nitrogen stable isotope compositions
of POM and fouling communities colonising hard substrates
(hereafter referred to as biofilters) adjacent to the fish farms and at
non-polluted reference locations were determined. Based on
differences in 
15
N/
14
N ratios in POM and organisms at both sites, the
contribution of cage-derived particulate nitrogen to the organisms’
diet and thus the efficiency of filtering organisms in removing the
particulate nitrogen waste were estimated. 
Experimental
At four fish farms in Oban (Scotland, N Atlantic), Piran (Slovenia,
N Adriatic), Crete (Greece, W Mediterranean) and Eilat (Israel, Red
Sea), biofiltering units consisting of several ?oating arrays of hard
substrates were installed in June 2001. Each array was a set of plastic
net cylinders (50 cm high, 25 cm in diameter) secured on horizontal
frames at 8 m depth. The biofilter arrays were oriented perpendicular
to the predominant current direction so as to maximise their exposure
to effluents released from the cages. The same structures were
installed at reference locations. 
Samples of particulate organic matter (POM) and fouling
organisms colonising the biofilters at the cages and at reference
locations were taken seasonally from July 2001 to May 2003.
Individual species and entire fouling communities from randomly
selected biofilters were analysed. Faecal material was analysed, too.
Stable isotope compositions of nitrogen were determined using a
continuous-?ow isotope ratio mass spectrometer (Europa 20-20 with
ANCA-SL preparation module) and expressed as relative deviation in
permil from the 
15
N/
14
N ratio of atmospheric nitrogen (
d
15
N).
Assuming that the isotope separation between food (i.e. POM) and
organisms was the same for the same species at the cages and at the
reference locations (1), the fraction of organisms’diet deriving from
the farm-derived waste was estimated using a simple mixing equation.
As end-members, 
d
15
N values of POM at reference locations and fish
faeces as farm-derived particulate waste were considered (2).
Remains of food pellets were considered as negligible since the food
conversion ratios have been reduced to ~1. 
Results and discussion
In most of the cases, a systematic enrichment in 
15
N was observed
in samples collected at the cages compared to those from reference
locations (Table 1). In Oban, d
15
N of POM and fouling organisms
were almost the same at both locations due to the dispersion and
mixing in the turbulent environment. In Piran, POM was enriched in
15
N at the cages compared to the reference location; however, the
organisms at reference location were enriched in 
15
N compared to the
biofilters at the cages. The farm-derived POM was obviously not the
only factor affecting the 
d
15
N of the fouling communities at both sites.
The in?uence of cage-derived POM on the 
d
15
N of fouling organisms
in Crete and in Eilat was detected as an enrichment of fouling
organisms at the cages in 
15
N compared to those at reference locations
by about 2‰. Lower 
d
15
N of the fouling organisms compared to the
POM in Crete are due to the taxonomic composition of the fouling
community, where bryozoans – relying predominantly on phyto-
plankton as a food source – prevailed. It was estimated that at the
same taxonomic composition of fouling communities colonising the
biofilters at the cages and at reference locations, about 76% and 65%
of nitrogen consumed by fouling communities on biofilters at the
farms in Crete and Eilat, respectively, derived from the fish cages. A
big discrepancy in efficiency of removing particulate waste between
entire communities and individual species was observed. The most
efficient in removing particulate waste from fish farms are annelids
(33-48% of recycled N derived from the cages), followed by ascideans
(27%), sponge (21%) and bivalves (19%). A mass calculation of N
consumption was made for the fish farm in Eilat and Crete.
Considering the dry masses of fouling communities (116-575 g/m
2
in
Eilat, 106 – 370 g/m
2
in Crete) and concentrations of N in organisms
(2.2 and 1% dry weight in Eilat and Crete, respectively), 1.6-7.5 g N
from fish cages per m
2
of biofilter was retained in Eilat and 
0.8-2.8 g/m
2
in Crete. 
Acknowledgement. This study was financed by the EU program-
me “Quality of Life and Management of Living Resources”, Contract
No. Q5RS-2000-30305.
References
1-Minagawa M., and Wada E., 1984. Stepwise enrichment of 
15
N along
food chains: Further evidence and the relation between 
d
15
N and animal
age. Geochim. Cosmochim. Acta, 48: 1135-1140.
2-McGhie T.K., Crawford C.M., Mitchell I.M., and O’Brien D., 2000.
The degradation of fish-cage waste during fallowing. Aquaculture, 187:
351-366.
Table 1. Nitrogen stable isotope compositions (
d
15
N) of particulate
organic nitrogen and organisms at four selected fish farms and reference
locations
*stripped from fish
** sampled in traps directly under the cages
+
homogenised samples of entire communities