Les hydrocarbures (HC) pétroliers libérés dans le milieu marin,
auront des conséquences graves aussi bien sur le plan économique que
sur le plan écologique, en causant souvent la dégradation des écosys-
tèmes. Une fois libérés, le devenir de ces HC sera fonction des dif-
férents facteurs abiotiques et biologiques (1). 
Certaines études ont montré que plusieurs espèces bactériennes ont
la capacité de biodégrader les composés pétroliers en les utilisant
comme source de carbone et d’énergie (2). C’est dans ce cadre que
cette étude a été entreprise afin de déterminer le degré de pollution
marine causée par la raffinerie (STIR) de Bizerte en Tunisie, qui utilise
l’eau de mer pour le nettoyage de ses réservoirs ainsi que ceux des
bateaux. Cette étude a aussi pour but d’évaluer la décontamination du
milieu marin par la biodégradation bactérienne.
Plusieurs échantillons ont été collectés à partir de la raffinerie elle
même à savoir les eaux des bassins de décantation et l’eau de rejet.
Des échantillons sont aussi collectés du milieu environnant : l’eau de
mer, l’eau interstitielle, les sédiments marins ainsi que l’eau de mer
d’une station située à quelques kilomètres du milieu de rejet. Une
étude organique a été réalisée sur tous les échantillons, elle consiste à
faire une extraction des (HC) par un solvant organique le chloroforme,
un fractionnement de l’extrait chloroformique par chromatographie en
phase liquide sur colonne en silice. L’étude organique se termine par
une étude qualitative des (HC) saturés et insaturés non aromatiques
par chromatographie en phase gazeuse.
Les résultats obtenus montrent que tous les échantillons présentent
des teneurs en HC totaux assez élevées allant jusqu'à 92 ppm pour les
sédiments marins. L’examen des pourcentages pondéraux des frac-
tions constituant l’extrait chloroformique montre une grande richesse
en HC légers (toujours > 70 %) par rapport aux composés lourds (tou-
jours < 30 %) (voir tableau 1), on peut conclure que les (HC) présents
dans ces échantillons ont nécessairement une origine pétrolière (3).
L’étude qualitative des HC saturés et insaturés non aromatiques par
chromatographie en phase gazeuse permet d’identifier une distribution
régulière des n-alcanes montrant une décroissance des plus légers vers
les plus lourds rappelant le chromatogramme d’un pétrole brut (4). Par
conséquent le traitement de l’eau de rejet réalisé par la raffinerie ne
permet pas de la décontaminer.
L’évaluation de la biodégradation bactérienne des HC pétroliers a
été réalisée au laboratoire en effectuant une étude organique quantita-
tive et qualitative des HC sur une 2ème portion des échantillons de
départ placés à l’air libre pendant une période de 3 mois.
Les résultats obtenus montrent une diminution importante des
teneurs en HC totaux pour tous les échantillons (10 ppm à 86 ppm) et
une chute des pourcentages pondéraux de la fraction légère (HC sat-
urés et insaturés non aromatiques et aromatiques ) qui varie de 0 % à
54 % par rapport à la fraction lourde (résine et asphaltène) qui varie de
47 % à 100% (voir tableau 1).
Ces données permettent désormais de conclure que les micro-organ-
ismes et en particuliers les bactéries attaquent principalement la frac-
tion légère alors que la fraction lourde n’est pas significativement util-
isée.
L’analyse des chromatogrammes des HC saturés et insaturés non
aromatiques montre en premier lieu la présence des "humps" représen-
tatifs des UCM au niveau des n-alcanes moyens à lourds traduisant
l’intervention d’une activité microbienne (5), on remarque aussi une
dégradation des pics représentatifs des n-alcanes. On peut conclure
alors que la biodégradation microbienne est responsable en grande
partie des changements chimiques de la composition des HC
pétroliers. Ceci est conforme aux résultats de certaines études qui ont
montré qu’en culture pure, la biodégradation des HC saturés et insat-
urés non aromatiques est plus importante que celle des aromatiques.
Toutefois, les résines et les asphaltènes (fraction lourde) résistent à
l’attaque microbienne (6). 
L’identification des bactéries hydrocarbonoclastes actives sur les
hydrocarbures a été réalisée à l’aide des galeries biochimiques API 20
E et API 20 NE (bio-Mérieux). Elle montre la présence des bactéries
du genre Burkholderia, Pseudomonas, Brevundimonas, Acinétobacter,
Serratia à côté des bacilles Gram+ sporulés. 
Références
1 - Harayama S, Kishira H, Kasai Y, et Shutsubo K., 1999. Petroleum
biodegradation in marine environments. J. Mol. Microbiol. Biotechnol.,
1(1) :63-70.
2 - Chaineau C. H., Morel J., Dupont J., Bury E., Oudot J., 1999.
Comparison of the fuel oil biodegradation potential of hydrocarbon-
assimilating microorganisms isolated from a temperate agricultural soil.
The science of the total environment, 227: 237-247.
5 – Albrecht P., Datillung M., Corbert  B. et Riolo J., 1983. Etude de
l’origine et de la transformation des marqueurs moléculaires dans les
sédiments marins profonds. D’ORGON A MISSADOR. (Rapport de
synthèse). Ed. CNRS. Paris  pp: 407-420.
6 – Mille G. YanYu Chen  et Du H., 1982. Hydrocarbures présents dans
des sédiments superficiels méditerranéens (zone côtière Os/mer –
Monaco). VIème journée. Etud. Pollution, Cannes. CAEM.: pp 191-198.
7- Gramby K. et Spliid N. H. (1995) – Hydrocarbons and
organochlorines in commun mussels from the kattaegat and the belts and
their relation to condition indeces.Marine pollution bulletin.Vol. 30 (1) :
74-82.
8 - Oudot J., Merlin F. X.  et Pinvidic P., 1998. Weathering rates of oil
components in a bioremediation experiment in estuarine sediments.
Marine environmental research,Vol. 45 (2) : 113-125.
Rapp. Comm. int. Mer Médit., 36,2001
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EVALUATION DE LA POLLUTION D’UN MILIEU MARIN PAR LES HYDROCARBURES PÉTROLIERS ET
LA DECONTAMINATION PAR BIODÉGRADATION MICROBIENNE 
Z. Ghnim-Khedir 
1
, J. Cheriaa 
2
, M. Hammami 
3
et D. Saidane 
1
*
1
Laboratoire de Physiologie Faculté de Pharmacie, Monastir,Tunisie
2
Laboratoire de Microbiologie Faculté de Pharmacie, Monastir,Tunisie
3
Laboratoire de Biochimie Faculté de Médecine, Monastir,Tunisie
Résumé
L’objet de cette étude est d’évaluer la décontamination d’un milieu marin pollué avec des hydrocarbures pétroliers par la biodégradation
bactérienne. Des échantillons d’eau ont été collectés à partir de la raffinerie (STIR) de Bizerte en Tunisie, d’autres du milieu environnant.
L’étude organique des hydrocarbures (HC) réalisée sur les échantillons montre : que le traitement effectué par la raffinerie ne permet pas
d’éliminer les HC et que la biodégradation est responsable en grande partie de l’élimination des HC légers. L’identification des bactéries
actives sur les HC montre la présence des bactéries du genre Burkholderia, Pseudomonas, Brevundimonas, Acinétobacter, Serratia à côté
des bacilles Gram+ sporulés.
Keywords : petroleum, sea water, bacteria, pollution
Tableau 1: Teneurs en  HC  totaux (HCT) exprimées en ppm, HC
saturés et insaturés non aromatiques (HCS) exprimées en %
des (HCT), HC aromatiques (HCA) exprimées en % des (HCT)  et
composés lourds (NSO) exprimées en % des (HCT) dans les
échantillons.
- Eau du 1er bassin : eau du 1er bassin de décantation.
- Eau  de mer (1) : eau de mer du milieu de rejet.
- Eau de mer (2) : eau de mer d’une station  située à quelques kilomètres du