Rapp. Comm. int. Mer Médit., 36,2001
303
Introduction
A. simplexmatures in the stomach of whale, while its infective
third–stage larvae can be found in the viscera and occasionally the
?esh of over 70 species of fish. The species is highly pathogenic to
men, wherever raw, marinated, (under) cooked fish meat is consum-
mated.
Materials and methods
A cage-reared European sea bass from the fish farm were held in
two tanks of 5 m
3
in running sea water (temperature 20°C, salinity
35‰). Third-stage larvae of A. simplexwere isolated from Atlantic
horse-mackerel (Trachurus trachurus) an thoroughly washed in 0.9 %
NaCl solution. Before the administration, larvae were measured under
the light microscope. After acclimatization period of two weeks, fish
were anaesthetized with benzocain and forced fed with the plastic
catheter. From 20 to 30 larvae were administrated in one feeding,
which was performed on the day 1, 3, 5. and 10. In the mean time, fish
were fed on standard commercial diet. Twenty- four hours after the
feeding, a random fish sample was taken, and autopsied. In the second
tank, the control group of fish was held, and fed only on commercial
diet.
Results
After the first and second feeding (day 1. and 3, respectively), fish
showed nematodes in stomach, but not in the intestine or under vis-
ceral serosis. Stomach was almost empty, with only a small amount of
transparent mucus, without erosions on the mucosa. The pyloric caeca
were filled with the large amount of tick, yellowish content. The same
was found in the intestine. Fish autopsied one hour after the forced
feeding, were found to contain live, vigorously moving larvae.
The day after the last forced feeding (day 10), all of the remaining
fish were autopsied, and found with the live larvae under different
parts of visceral serosis.
The larvae isolated from infected fish were alive and showed no dif-
ference in the body length.
The relation between the mean weight of the fish and isolated lar-
vae from viscera, is given in figure 1. That correlation is – 0,161.
The localization and the number of isolated larvae is shown in
table1.
The autopsied control group showed no larvae.
Discussion
The attempts to transmit experimentally infective stage of Ascaroid
nematods has been studied to elucidate questions regarding their
migration patterns during life cycle. Křie (1) succeeded to transmit
Contracaecum osculatumto various fish species, exposing them to
ensheated third-stage larvae, infected copepods or via infected inter-
mediate fish host. She concluded that larvae migrating into wall of the
pyloric caeca reached mesentery, and those penetrating the intestinal
wall, reached liver via the blood vessels. Smith et al. (2) infected rain-
b ow trout (Oncorhyncus mykiss) with C. osculatuma 
d
Pseudoterranova decipiensand monitored the development of the lar-
vae, concluding that they grew within 270 days 10.2 (mean value) in
length. When Moser et al. (3) tried to infect striped bass (Morone sax-
atilis) with A. simplexlarvae, he obtained only two from six positive
bass, with the number of one to four larvae per fish, respectively.
The present study indicates that even European sea bass is not a
usual host of A. simplex, the infection is possible, while the migrations
from the stomach to different sites takes 5-10 days post infection. 
The unusual site of localization of the larvae and their high viability,
indicate the huge adaptation possibilities of this nematode, even the growth
of larvae was not noticed, because of very short period which they passed
in fish body.
The largest number found in mesenteric fat suggest that the fat acts
only as a way trough which the passing is made, in attempt to reach
other more convenient site.
The correlation between the number of isolated larvae and the fish
weight is negative and insignificant, meaning that the success in pen-
etration of the gastrointestinal tract in this case does not depend on fish
size.
Figure 1. Regression scatterplot of correlation between the
mean weight of fish and number of isolated A. simplexlarvae.
Table 1. The localization and the number of isolated larvae of
A. simplexfrom European sea bass.
References
1 – Křie M. and Fagerholm H.P., 1995. The life cycle of Contacaecum
osculatum(Rudolphi, 1802) sensu stricto (Nematoda, Ascaridoidea,
Anisakidae) in view of experimental infections. Parasitol. Res., 81 : 481-
489.
2 – Smith J.W., ElarifiA.E., Wootten R., PikeA.W. and Burt M.D.B.,
1990. Experimental infection of rainbow trout Oncorhynchus mykiss,
withContraceacum osculatum(Rudolphy, 1802) and Pseudoterranova
decipiens(Krabbe, 1878) (Nematoda : Ascaridoidea). Can. J. Fish Aquat.
Sci., 47 : 2293-2296.
3 – Moser M., Sakanari J.A., Reilly C.A. and Whipple J., 1985.
Prevalence, intensity, longevity, and persistence of Anisakis simplex
larvae and Lacistorhynchus teniusmetacestodes in San Francisco striped
bass.NOAATechnical report, NMFS29.
EXPERIMENTAL INFECTION OF EUROPEAN SEA BASS (DICENTRARCHUS LABRAX)
WITHANISAKIS SIMPLEXTHIRD-STAGE LARVAE (NEMATODA : ASCARIDOIDEA)
Ivona Mladineo
Institute of Oceanography and Fisheries.P.O.BOx 500 - 21000 Split, Croatia - mladineo@izor.hr
Abstract
Infective larvae of Anisakis simplexwere experimentally administrated to a cage reared European sea bass (Dicentrarchus labrax). First
positive findings were noticed five days after the first forced feeding with the third – stage larvae. The larvae showed high viability and
vigor, even if they were isolated from an unusual and accidental fish host and from a non-predilected site.
Keywords : Dicentrarchus labrax, Anisakis simplex, experimental infection